《人生双行线》通过铁路系统改革，四次铁路大提速，青藏铁路建设，以及建设和谐铁路的故事，来反映时代主旋律，反映现代铁路人的精神风貌、改革成果。该剧通过刻划讴歌以李抒为代表的两代铁路人，从不同角度展现了当代铁路人积极向上的精神风貌，通过讲述铁路干线各岗位工作人员的感人事迹，赞美了他们默默奉献无所求的自我牺牲精神……
美丽的女孩梅云（孙菲菲 饰）是上海药业大亨梅雨亭的爱女，虽出身富庶家庭，但是她胸怀崇高理想与情操，志愿投身革命事业。为此，她不惜抛弃养尊处优的生活，拉着姐姐梅兰和佣人阿牛追随新四军的脚步。梅氏姐妹经历了难以想象的磨练，最终梅兰不堪忍受，回到家中，与心怀叵测的汪伪政府特务头子沈子鹤结为夫妇。而梅云留在新四军中，渐渐喜欢上了一向讨厌的江南独立大队队长凌永达（焦恩俊 饰），同时渐渐成长为一个出色的特工。 在首长的授意下，梅云假意脱离革命，潜入汪伪政府搜集情报。在此过程中，她的生命、信仰和爱情皆经受着巨大而严苛的考验……
初入大学殿堂，同为艺术学院学生的夏丽叶、林朵、莫小邪、秦妮被分在同一宿舍，开始了互相磨合、逐渐理解包容的成长之路。爱慕虚荣、脾气暴躁的夏丽叶另有苦衷，乖乖女林朵居然有难以启齿的过往，柴禾妞秦妮看似大大咧咧实则大智若愚，大小姐出身的莫小邪扮演仗义女侠，默默付出......每个人的秘密和误会逐渐被解开。
